27、自由活动动物大脑疼痛成像的实验流程与方法

自由活动动物大脑疼痛成像的实验流程与方法

在神经科学研究中，对自由活动动物大脑疼痛成像的研究具有重要意义。本文将详细介绍相关的实验流程和方法，包括植入操作、GCaMP 表达验证、显微镜安装以及疼痛成像等关键步骤。

1. 植入操作

• 密封植入部位 ：用少量紫外线固化胶水环绕植入部位，然后进行固化以密封。接着用骨刮刀在颅骨表面划痕，并按照试剂盒说明涂抹牙本质活化剂。
• 覆盖套管或微内窥镜 ：使用粘合剂水泥（C&B，S380 Metabond Quick Adhesive Cement System）覆盖套管或微内窥镜，等待 2 - 3 分钟让水泥凝固。同时要监测水泥下是否有血液积聚，因为这可能会影响其与颅骨表面的粘附。
• 放置头杆并固定 ：将定制的激光切割头杆（18 - 24G 厚度的不锈钢）放置在左后颅骨螺钉上，然后涂抹一层牙科水泥（Coltene Whaledent，Hygenic Perm），将头杆和套管固定在颅骨上。水泥应均匀覆盖整个颅骨表面和切口边缘附近的一层薄皮肤。
• 干燥与覆盖 ：让水泥干燥 7 - 10 分钟，然后用生物胶带（NC9033794 Tegaderm Transparent Dressing）覆盖套管，用紫外线胶水（Loctite(R) Light - Activated Adhesive #4305）将胶带固定在水泥上。如果直接植入 GRIN 透镜，则先用 PCR 管的切割底端覆盖，再用生物胶带覆盖，在胶带边缘涂抹紫外线胶水并固化。