【科研实验干货分享】Cyanine3-a-Bungarotoxin的实验步骤

一、试剂详情

英文名称：Cy3-a-Bungarotoxin，Cyanine3-a-Bungarotoxin
中文名称：Cy3-a-银环蛇
激发波长：554 nm
发射波长：568 nm
规格：100 ug（可按需包装）
纯度：95％+
试剂性状：固体
溶解性：溶于部分有机溶液，溶于水。
储存条件：不超-20℃干燥、避光储存
注意事项：不可反复冻融，现配现用！
 

三、核心功能与应用

1.特异性标记
靶点：神经肌肉接头处的烟碱型乙酰胆碱受体（nAChRs）。
机制：α-Bungarotoxin 与受体结合后，Cy3 荧光信号可定位受体分布。
优势：标记后保留高亲和力结合活性，不影响受体功能。
2.荧光成像技术
设备：荧光显微镜、共聚焦显微镜、超分辨率显微镜。
应用场景：
受体定位研究：可视化神经肌肉接头处 nAChRs 的分布。
活细胞/固定细胞成像：动态观测活细胞或定量分析固定组织中的受体。
3.实验
原理：α-Bungarotoxin 与受体的结合不可逆，可用于评估其他药物或配体与受体的结合能力。

四、实验步骤

以下是用Cy3-a-Bungarotoxin缀合物对大鼠骨骼肌的 10um 厚新鲜冷冻切片进行染色的示例方案，可能需要针对其他应用进行优化。a-Bungarotoxin结合物染色可以与免疫荧光染色同时进行。
1. 在室温下，将新鲜冷冻的切片在含 4%多聚甲醛的 PBS 中固定 15 分钟。或者，切片可以在-20°c 的冰冷甲醇
中固定 5 分钟，用 PBS 冲洗 3 次。
2. 室温下用 PBS/0.1% Triton X-100 渗透切片 10 分钟。甲醇固定切片不需要渗透。
3. 在 PBS 中制备 1 微克/毫升 a-Bungarotoxin的染色溶液。缀合物也可以在免疫荧光封闭缓冲液中稀释。
4. 用足够的染色溶液覆盖切片，以完全覆盖组织。可以将一个正方形的石蜡膜放在染色溶液的上面，使溶液均
匀地涂在切片上。
5. 在室温下，在黑暗潮湿的室内培养至少 15 分钟。
6. 在 PBS 中冲洗几次。
7. 安装在荧光防伪安装介质和盖玻片上。

五、相关科研试剂

diSulfo-Cy3 alkyne，二磺酸-花青素Cy3-炔基
2055138-88-8
Cy3 CTB；花青素染料Cy3标记的霍乱B亚基
Cyanine3 azide，Cy3-N3
1167421-28-4
Cy3-PEG-NHS，Cyanine3-PEG-NHS，MW：2000
Cy3 NHS ester，Cyanine3 NHS ester
1393363-07-9
N-(m-PEG4)-N'-(azide-PEG4)-Cy3
2107273-38-9
DSPE-PEG-Cy3，Cyanine3-PEG-DSPE，MW：20000
Sulfo-Cyanine3 amine，Sulfo-Cy3-NH2
2183440-43-7
Sulfo-Cyanine3 carboxylic acid，Sulfo-Cy3 COOH
1121756-11-3
Sulfo-Cyanine3 alkyne，Sulfo-Cy3 alkyne
2055138-87-7
ICG-PEG-DSPE，DSPE-PEG-ICG，MW：10000

小华温馨提示：该试剂仅限于科学研究或工业应用等非医疗领域的使用。