单细胞-拟时序分析-R包SCORPIUS

跟着Cell学单细胞转录组分析(九):Monocle2拟时分析演示(上) 拟时分析是单细胞转录组高级分析内容,也是比较有价值的分析,拟时分析基本使用的都是monocle包,用的最多的是monocle2,我们以之前immun细胞中的0,3,7群Macrophage为例,数据没有意义,仅演示拟时分析。更多详细的拟时分析原理,内容解析可以参考官网:http://cole-trapnell-lab.github.io/monocle-release/docs/。 加载R包,构建拟时分析文件。 if (!requireNamespace("BiocManager", quiet 阅读详情

 注:代码转自生信技能树,仅做学习笔记。icon-default.png?t=M0H8https://mp.weixin.qq.com/s/rho-EPb804bSd8w334BNQw

准备工作, 安装及加载R包,载入数据,查看数据类型。

install.packages("SCORPIUS")
library(SCORPIUS)
data(ginhoux)
ginhoux
class(ginhoux)
str(ginhoux)
c<-ginhoux[[1]]
g<-ginhoux[[2]]

c<-ginhoux[[1]]

g<-ginhoux[[2]]
expression <- ginhoux$expression
group_name <- ginhoux$sample_info$group_name
table(group_name)
dim(expression)
expression[1:4,1:4]

该数据 245个细胞,2000个基因,然后细胞分成了3组

space <- reduce_dimensionality(expression, "spearman")
draw_trajectory_plot(space, group_name, contour = TRUE)
space <- reduce_dimensionality(expression, "spearman")
draw_trajectory_plot(space, group_name, contour = TRUE)
traj <- infer_trajectory(space)
draw_trajectory_plot(space, group_name, traj$path, contour = TRUE)

# warning: setting num_permutations to 10 requires a long time (~30min) to run!
# set it to 0 and define a manual cutoff for the genes (e.g. top 200) for a much shorter execution time.
gimp <- gene_importances(
  expression, 
  traj$time, 
  num_permutations = 10, 
  num_threads = 8, 
  ntree = 10000,
  ntree_perm = 1000
) 
gimp$qvalue <- p.adjust(gimp$pvalue, "BH", length(gimp$pvalue))
gene_sel <- gimp$gene[gimp$qvalue < .05]
expr_sel <- scale_quantile(expression[,gene_sel])

# Draw a time series heatmap
time <- traj$time
draw_trajectory_heatmap(expr_sel, time)

## Also show the progression groupings
draw_trajectory_heatmap(expr_sel, time, 
                        progression_group=group_name)

## 换一个配色
table(group_name)
draw_trajectory_heatmap(
  expr_sel, time, progression_group=group_name,
  progression_group_palette = setNames(RColorBrewer::brewer.pal(3, "Set2"),
                                       levels(group_name))
)

## 基因也可以分组
modules <- extract_modules(scale_quantile(expr_sel))

draw_trajectory_heatmap(expr_sel, time,
                        progression_group=group_name, modules=modules)

 

单细胞分析实录(15): 基于monocle2的拟时序分析 关于什么是“拟时序分析”,可以参考本期推送的另一篇推文。这一篇直接演示代码 monocle2这个软件用得太多了,很多文章都是monocle2的图。因为只使用表达矩阵作为输入,相比于其他软件,已经很方便了。不过话说回来,我总感觉这种轨迹推断像玄学,大半的结果是调整出来的/事先已知的,比如拟时序里面的起始状态经常需要自己指定。 在做拟时序之前,最好先跑完seurat标准流程,并注释好细胞类型。我这里使用的数据都已经注释好细胞类型,并且事先已经知道哪一个细胞类型可能是初始状态。 1. 导入数据,创建对象,预处. 阅读详情

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萍智医信
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