1. 基于VCF 文件中计算次等位基因频率(MAF) 1.1 bcftools mpileup call变异 # 使用bcftools mpileup生成过滤后的VCF bcftools mpileup -Ou -f reference.fa input.bam | bcftools call -mv -Oz -o filtered.vcf.gz # 解压缩 gunzip filtered.vcf.gz 1.2 过滤低质量位点(提升准确性)