关于两种支原体检测试剂盒测评

细胞培养技术在生物制药、疫苗生产和临床细胞治疗等领域都是必不可少的核心环节之一。然而在培养过程中面临一个严重问题是细胞经常会被污染，其中支原体是最主要的污染源。支原体污染后又可通过血清，实验人员和已污染的细胞培养物等途径进行扩散，引发细胞样品的更大面积污染。

支原体污染成为细胞培养的重大隐患:

1．研究表明，世界范围内超过15%的培养细胞都有支原体污染。

2．支原体污染会对细胞造成多方面的影响，包括代谢、免疫或生化特性、生长状况、以及细胞存活等多方面的改变。

3．支原体污染会影响实验结果的稳定性、可靠性和准确性。

4．支原体难以检测，同时也很难消除。支原体能轻易地通过标准滤膜，同时也能拮抗绝大多数的抗生素，给细胞培养造成巨大损失。

因此细胞培养中必须提高对支原体污染的警惕，坚持定期做支原体的检测，努力杜绝污染。所以寻找一种快速简单灵敏的方法进行细胞支原体常规检测就显得尤为重要。

方案一：

LONZA支原体检测试剂盒

01 检测原理

美国Lonza MycoAlert Mycoplasma Detection Kit支原体检测试剂盒是利用支原体酶的这一特定活性，进行选择性的生物化学检测。这些酶的存在提供了一种快速的筛选操作，能灵敏地检测出样本中的支原体污染。这些存活的支原体被溶解，然后释放出来的酶与支原体检测试剂盒中提供的底物发生催化反应，将ADP转化成ATP。通过测量样品中添加底物前后ATP的含量，可以得到一个比率，该比率指示支原体是否存在。如果这些酶不存在，第二次读数相对于第一次读数就没有增加；如果酶与底物进行特异性反应，就会导致ATP含量上升。

ATP含量的上升通过生物发光化学反应可以检测到，其公式如下：

Luciferase ATP + Luciferin + O2 ——————> Oxyluciferin + AMP Mg 2+ + PPi + CO2 + LIGHT

这个反应的发生是在室温(18°C～22°C)进行的，也是荧光素酶反应的最佳温度。

在支原体检测试剂盒的检测原理中，最后通过分光光度计读数，由于发出光的强度与ATP的浓度成线性关系，因此可检测支原体的污染问题。

02 技术参数

» 生物发光技术，无需DNA提取物

» 样品检测只需两步移液操作，结果分析简单

» 可以和低灵敏性的板光度计或多功能读数器配用

» 可用于检测未启用培养基，培养基补充物或水溶液

» 快速方便，标准程序20分钟就可出结果

» 通用性强，可检测所有常见的支原体污染(不含脲原体属)

 

方案二：

MP Bio支原体检测试剂盒

MP BiomedicalsMycoplasma Stain Kit，用于细胞培养中支原体污染以及其他原核生物的检测。该试剂盒的原理是：Hoechst33258染料能够选择性结合在DNA 的凹槽中，有效标记细胞核。在荧光显微镜下被支原体污染的细胞经染色后，除了细胞本身的细胞核能够显示荧光外，在细胞核外与细胞周围能够均可以看到许多大小均一的荧光点，即为支原体DNA，证明有支原体污染。

MP Biomedicals是一家全球性的跨国公司，总部位于 美国加利福尼亚州。公司的产品总数超过55000种。作为生命科学类产品的供应商，至今已有50多年的历史。

技术参数：

可靠性：使用TCA引用的Hoechst的荧光染色法（TCAprocedure No.75361）

完整性：试剂盒包含染色剂、稀释液、封闭剂和对照样品

用途：不仅可检测支原体，还可以用于细菌、酵母菌、真菌的检测

速度：检测全程不超过2小时,微信搜索“泽平科技”立即进入咨询报价！